Natrijev citrat pufer se koristi za izolaciju RNK jer smanjuje bazičnu hidrolizu RNA lanaca. To ga čini važnim korakom u purifikaciji mRNA tijekom genomskog istraživanja ili za proučavanje transkripcije.
Puferi koji se temelje na citratima također mogu pomoći otkrivanju antigena u fiksiranim tkivnim pripravcima jer razbiju križne veze nastale između antigena i medija za fiksaciju.
S vodičem u nastavku, napravite natrijev citratni pufer pH 6. Upute su ne samo lagane već i brzo izvedene. Trebalo bi samo oko 10 minuta da biste dovršili ove korake.
Dvije mogućnosti za izradu spremnika
Dva su načina da napravite natrijev citratni pufer. Prvo, odredite da li imate i limunsku kiselinu i bazu konjugata, natrijev citrat, za rad. Ako imate samo limunsku kiselinu, to nije problem. I dalje možete napraviti spremnik.
S druge strane, ako imate i kiselinu i bazu, stvorite zalihu otopine svake od njih. Pomiješajte 21 grama limunske kiseline u 1 litru destilirane vode i 29,4 grama natrijevog citrata u 1 litru destilirane vode.
Ako imate samo limunsku kiselinu, pomiješajte 2,1 grama u manje od 1 litre destilirane vode i nastavite do sljedećeg koraka.
Miješanje otopina limunske kiseline i natrijevog citrata
Sada kada ste stvorili svoju zalihu otopinu (ako ste imali i kiselinu i bazu) ili pomiješali kiselinu u destiliranoj vodi (ako niste), možete se usredotočiti na svoje rješenje.
Pomiješajte 82 ml otopine limunske kiseline sa 18 ml otopine natrijevog citrata.
Zatim, ukupni volumen smjese podignite na manje od 1 litre destiliranom vodom. Ostavite dovoljno volumena da se dopusti dodavanje natrijevog hidroksida (NaOH) u sljedećem koraku.
Podešavanje pH
Dok je lagano miješanje otopine korištenjem magnetske mješalice, upotrijebite 1M natrijev hidroksid da se pH mješavine namjesti na 6.0. Nakon toga, stavite konačni volumen otopine do 1 litre destiliranom vodom pomoću volumetrijske tikvice.
Što trebate napraviti
Ne samo da vam neće dugo trajati da napravite natrijev citratni pufer, niti za to nećete trebati mnogo materijala. S limunskom kiselinom, 1M natrijevog hidroksida, destiliranom vodom i kalibriranom pH sondom, bit ćete na pola puta. Upotreba natrijevog citrata je opcionalno.
Izrada tampona također će zahtijevati 1 litreni stupanjski cilindar, volumetrijsku tikvicu od 1 litre i tri 1 l medijske boce. Na kraju, trebat će vam magnetska miješalica i magnetska miješalica.
Ako nemate sve te materijale, razmislite o korištenju laboratorija u svojoj školi ili radnoj sobi, tako da ih ne morate sami kupiti. Također možete jednostavno kupiti ove materijale online ili posjetiti trgovinu specijalnih roba u vašem području.